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【摘要】目的 探讨乙型肝炎病毒(HBV)前S1抗原(Pre-S1)与乙肝病毒DNA(HBV-DNA)和乙型肝炎e抗原(HBeAg)之间的相关性，为乙型肝炎的诊断、疗效评估提供科学依据。方法 1120例临床标本分别采用定量PCR技术检测HBV-DNA载量;采用酶联免疫法(ELISA)法检测HBeAg;采用酶联免疫法(ELISA)检测前S1抗原。结果 569例HBV-DNA PCR阳性标本中，前S1抗原阳性448例，HBeAg阳性252例，两种检测结果间存在显著差异(P<0.05)。结论 血清前S1抗原、HBeAg与HBV复制密切相关。作为反映HBV复制的指标，前S1抗原优于HBeAg，前S1抗原在乙肝流行病学调查上和临床诊断及疗效观察方面有重要的临床价值。
【关键词】前S1抗原 乙型肝炎e抗原 乙型肝炎病毒
乙型肝炎病毒(HBV)感染是一个全球关注的健康问题，也是世界范围内导致慢性肝脏疾病最常见的原因。我国为高发区，约有10%的人口为HBV携带者。研究发现，HBV前S1抗原(PreS1-Ag)的检测对乙型肝炎的早期诊断、病情和药物疗效及预后判断具有十分重要意义，PreS1-Ag是继“乙型肝炎两对半”后，检验HBV感染的新标志物。乙肝肝炎病毒前S1抗原、前S2抗原和HBeAg三者共同构成乙肝肝炎病毒(HBV)外壳大蛋白[1-2]。HBV-DNA PCR 检测作为乙肝病毒复制的金标准,由于受到实验本身对实验条件要求较高等因素制约，通常临床多以检测乙肝血清标志物中的HBeAg作为反映病毒复制情况的依据。但目前较多的证据显示HBeAg 作为反映乙肝病毒复制情况的标志物并不敏感[3-4]。本文对1120例临床慢性乙肝病人血清进行了HBV-DNA PCR测定及前S1抗原和HBeAg检测，比较了后两者对于反映病毒复制情况的敏感性。
1 方法与材料
1.1 标本来源 2008年5月～2010年5月间收集本院慢性乙肝病人血清1120例。其中男性802例，女性317例，年龄在18～65岁之间。排除患有其他类型肝炎或肝脏其它疾病。血液于采集2h内经1500r/min离心，于当日完成全部试验。
1.2 方法
1.2.1 前S1抗原采用酶联免疫双抗体夹心ELISA法，使用上海阿尔法医药有限公司生产的试剂盒。严格按试剂说明书操作。
1.2.2 HBeAg采用酶联免疫法测定，使用上海实业科华生物技术有限公司试剂。严格按试剂说明书操作。
1.2.3 HBV-DNA采用定量PCR，使用中山大学达安基因股份公司DA7600实时荧光定量PCR扩增仪，试剂为中山大学达安基因股份公司生产的HBV-DNA PCR试剂盒，严格按试剂说明书操作。
1.3 统计方法 所有数据分析采用SPSS10.0统计软件包处理，计数资料的比较采用x2检验。
2 结果
2.1 Pre-S1抗原、HBeAg与HBV DNA关系： 1120例标本中有569例HBV-DNA PCR阳性;以HBV DNA阳性为标准，HBeAg、 Pre-S1抗原 的检出率分别为43.9%(250/569)、77.8%(443/569);与HBV-DNA的总符合率分别为71.7%(803/1120)、86.7%(971/1120),说明在判断HBV复制有无及活跃程度方面，检测Pre-S1抗原比HBeAg更有意义。经配对计数X2检验，HBV DNA与HBeAg检出率差异有显著性;HBV DNA与Pre-S1抗原检出率差异无显著性(见表1)，说明HBeAg阴性并不能除外HBV复制。HBeAg检出率与Pre-S1检出率比差异有显著性(X2=15.26，P<0.05)。
表1 Pre-S1抗原、HBeAg与HBV DNA关系 HBV DNA与 Pre-S1比，X2=1.02,P>0.05; HBV DNA与HBeAg比，X2=21.54,P<0.05。
3 讨论
HBV双链DNA含有四个编码蛋白的基因组，分别是S基因、C基因、P基因、X基因。S基因可分为前S1基因、前S2基因和S基因。由S基因组编码可得到三类乙肝病毒外膜蛋白：226个氨基酸组成的肽段，即S基因;281个氨基酸组成的肽段，含S蛋白和前S2蛋白;389个氨基酸组成的肽段，含S蛋白、前S2蛋白和前S1蛋白。乙肝病人血清中含有三种颗粒，即：完整的病毒颗粒Dane颗粒、小球型颗粒和管型颗粒。其中只有Dane颗粒含有病毒DNA，能进行复制，具有传染性。前S1蛋白主要存在Dane颗粒上[5]。正常人肝细胞膜上存在HBV前S1抗原受体,能直接吸附HBV，这种受体与HBV的结合点定位于前S1R 21～47氨基酸序列上[6]。
核酸扩增荧光定量检测法可敏感检测出HBV DNA的含量，通常将HBV DNA定量>103拷贝/ml判断为HBV DNA阳性。以HBV DNA阳性为标准，Pre-S1抗原的检出率、与HBV DNA的总符合率均较HBeAg阳性者高，说明判断HBV有无复制及复制活跃程度方面，检测Pre-S1抗原比HBeAg更有意义[7-8]。
综上所述,HBV-M,HBV-DNA和前S1抗原之间的检测结果有相互关联,但所表达的临床意义并不完全一致,对不同类型HBV感染患者前S1抗原,HBV-DNA和HBV-M联合动态检测有助于临床诊断、疗效观察及预后判断。HBV-DNA和HBeAg是反映HBV感染复制的重要标志, PreS1抗原不仅是反映病毒复制的标志,而且比HBeAg敏感性更高,有很好的独立参考价值。PreS1抗原在乙肝的临床诊断及疗效观察等方面中起到重要作用,对HBV-M,HBV-DNA的检测有重要的补充作用。同时还可以作为输血前常规检查,可以很大程度减少输血后肝炎的发生。
参考文献
[1] 侯晓菁，梁艳，何凤春，等.乙型肝炎病毒前抗原与e抗原、乙型肝炎病毒DNA的相关性分析[J].第二军医大学学报，2007，28(12)：1306-1308.
[2] 李步荣，李丽华，李妙羡.乙肝病毒PreS1抗原的临床应用[J].第四军医大学学报，2007，28(5)：442-444..
[3] 李鲁平,张晓月,张月.慢性乙型肝炎乙病毒大蛋白检测分析[J].中国公共卫生,2007,23(12):221-222.
[4] 吴正林,刘玢,肖桂初,等.乙型肝炎病毒表面大蛋白与HBV DNA检测的对比研究[J].中国实验诊断学,2007,4:479-481.
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